EdU 细胞增殖检测试剂盒 红光（细胞成像法）_200-2000T

一、产品原理

EdU（5-乙炔基-2′-脱氧尿苷）是胸腺嘧啶核苷类似物，细胞增殖 S 期，EdU 会掺入新合成 DNA 链。试剂盒利用铜离子催化的点击化学反应，将 TAMRA 红色荧光标记分子共价结合到 EdU 上，直接标记增殖细胞 DNA。 区别于 BrdU 方法：不需要盐酸变性解链 DNA，无需抗体孵育步骤，操作流程简短，更好保留细胞形态与蛋白抗原位点，可和免疫荧光进行共染色。本试剂盒适用于体外细胞、细胞爬片样本成像检测，不适合动物活体注射。

二、试剂盒组分

1. EdU 溶液

2. Click-iT 反应缓冲液

3. 铜离子催化剂

4. TAMRA 红色荧光染料溶液

5. 反应缓冲添加剂

6. Hoechst-33342 细胞核染色液

提示：缓冲添加剂易氧化，变黄即失效，需要现配现用。

三、实验流程（细胞爬片 / 贴壁细胞）

1. 细胞 EdU 标记 将 EdU 按工作浓度加入细胞培养液，置于培养箱孵育；孵育时长根据细胞增殖速度调整。孵育结束，弃培养基，PBS 清洗细胞。

2. 细胞固定与通透 4% 多聚甲醛室温固定 15-20 min；PBS 洗涤；使用 Triton X-100 通透液室温通透 10-15 min；PBS 充分洗涤。

3. 点击染色工作液配制（现配现用，避光） 按照说明书配比混合反应缓冲液、催化剂、荧光染料、缓冲添加剂，充分混匀。滴加至样本表面，室温避光孵育 30 min。孵育完成，PBS 洗净染色液。

4. 细胞核复染 Hoechst-33342 稀释后，避光孵育 10-15 min 标记全部细胞核；PBS 洗涤。

5. 封片与成像 推荐抗荧光淬灭封片剂封片；荧光显微镜采集图像： -TAMRA 红色通道：EdU 增殖阳性信号- DAPI 通道：Hoechst 细胞核信号

染色样本避光 4℃短期保存，建议染色完成后尽快拍照检测。

四、产品特点

1. 点击化学检测，无需 DNA 变性，无需抗体孵育，缩短实验时长；

2. TAMRA 红色荧光，荧光信号稳定，信噪比高，适配常规荧光显微镜；

3. 可与免疫荧光共染，实现增殖标记 + 蛋白标记多色成像；

4. 两种规格可选，JX0902 适合中小型实验，JX0902-01 适合高通量、批量样本；

5. 全套组分齐全，开箱即可配置工作液开展实验。

五、储存与有效期

1. 试剂盒-20℃避光保存，禁止反复冻融；

2. 缓冲添加剂开盖后注意密封，氧化发黄禁止使用；

3. 有效期 12 个月，请在标签有效期内使用。

六、注意事项

1. 本产品仅限科研用途，不用于临床诊断、人体实验。

2. 染色全部步骤需要避光操作，防止荧光淬灭。

3. 点击染色工作液必须现配现用，不能长期存放。

4. 样本通透要充分，通透不足会造成染色信号偏弱。

5. 若需要动物体内注射 EdU，请选用动物注射专用版本试剂盒。

七、规格清单