0.25%胰酶消化液 （含EDTA）

一、产品简介

0.25% 胰酶消化液（含 EDTA）是细胞培养中最常用的贴壁细胞传代消化液。本品含 0.25% 胰蛋白酶与 EDTA，经 0.22μm 过滤除菌，即开即用。 胰蛋白酶可特异性水解细胞之间以及细胞与基底膜之间的黏附蛋白，使贴壁细胞从培养容器表面脱离。EDTA 能够螯合钙镁离子，抑制钙镁依赖性细胞黏附作用，协同增强消化效果，特别适合较难脱壁的贴壁细胞，广泛应用于各类贴壁细胞的传代、细胞收获等体外科研实验。

二、产品特点

1. 即用型无菌制剂，0.22μm 过滤除菌，无需自行配制；

2. 胰酶 + EDTA 复配，螯合钙镁离子，消化解离效果更强；

3. 批次稳定，活性可控，适配绝大多数常规贴壁细胞；

4. 操作简单，是细胞实验室基础常备消化试剂。

三、储存与运输

运输：低温冰袋运输；

保存条件：建议分装为 5~10mL 小管，-20℃避光保存；避免反复冻融，反复冻融会降低胰酶活性。

四、标准操作流程

1. 预热：胰酶消化液取出后，置于 37℃水浴或培养箱预热。

2. 洗涤：弃去旧培养基，使用 DPBS 或 PBS 洗涤细胞 1-2 次，去除残留血清（血清会抑制胰酶活性）。

3. 消化：加入适量胰酶消化液（T25 瓶约 1-2 mL，T75 瓶约 3-5 mL），放置 37℃孵育。

4. 观察：显微镜下观察，细胞变圆、间隙增大、开始脱落，一般 1-5 分钟。

5. 终止：加入等体积含血清完全培养基，轻柔吹打，分散细胞。

6. 离心：收集全部细胞悬液，300×g 离心 5 分钟，弃上清。

7. 重悬：加入新鲜完全培养基重悬细胞，按比例进行传代培养。

五、质量控制

产品经细菌、真菌无菌检测，消化活性经过细胞验证，合格出厂。

六、注意事项

1. 必须终止：胰酶消化完成后，必须使用含血清培养基终止酶活，残留胰酶会持续损伤细胞膜。

2. 控制时间：消化时间过长会破坏细胞膜蛋白，降低细胞活率，镜下观察及时终止。

3. 预热使用：37℃预热可提升消化效率，缩短消化时间。

4. 分装保存：建议分装小管后 - 20℃保存，减少反复冻融。

5. 不适用于悬浮细胞：悬浮细胞不需要消化处理。