0.25%胰酶消化液 （含EDTA）

产品概述

0.25%胰酶消化液（含EDTA） 是细胞培养中最常用的贴壁细胞传代消化液。本产品含0.25%胰蛋白酶和EDTA，已过滤除菌，即开即用。

• 胰蛋白酶：特异性水解细胞间及细胞与基底膜间的黏附蛋白，使细胞从培养皿底脱离。

• EDTA：螯合钙镁离子，抑制钙镁依赖性细胞黏附，协同增强消化效果，尤其适用于消化较难脱壁的细胞。

标准操作流程：

1. 预热：将胰酶消化液从冰箱取出，37°C水浴或培养箱中预热

2. 洗涤：弃去旧培养基，加入DPBS或PBS洗涤细胞1-2次（去除血清残留，血清会抑制胰酶活性）

3. 消化：加入适量胰酶消化液（T25瓶约1-2 mL，T75瓶约3-5 mL），37°C孵育

4. 观察：显微镜下观察细胞变圆、间隙增大、开始脱落（通常1-5分钟）

5. 终止：加入等体积含血清的完全培养基，轻轻吹打使细胞分散

6. 离心：收集细胞悬液，300×g离心5分钟，弃上清

7. 重悬：用新鲜完全培养基重悬细胞，按比例传代

注意事项

1. 必须终止：胰酶消化后必须用含血清的培养基终止，否则残留胰酶会损伤细胞

2. 控制时间：消化时间过长会损伤细胞膜蛋白，影响细胞活率

3. 预热使用：37°C预热可提高消化效率，缩短消化时间

4. 分装保存：建议分装成小管（如5-10 mL）-20°C保存，避免反复冻融

5. 不适用于悬浮细胞：悬浮细胞无需消化

6. 对某些细胞毒性：EDTA可能对某些敏感细胞（如神经元）有毒性，建议改用不含EDTA的版本