CHO细胞无血清培养基 （化学成分限定）-试用装

产品简介

JxCD CHO 无血清培养基是由苏州君欣生物团队精心优化筛选的一款化学成分限定、不含动物源成分、 不含水解物、不含蛋白质或任何其他化学成分不明确的物质，以保证细胞培养的过程的安全性和稳定性。该 培养基适用于CHO细胞的蛋白生产，并且适用于CHO细胞的悬浮培养，具备保持其良好的增殖速率的特性。 

产品描述 

JxCD CHO 无血清培养基的成分中不含L-谷氨酰胺、HT、抗结团剂及抗生素；当使用GS作为筛选系统时， 应使用不含L-谷氨酰胺的培养基；该培养基成分中不含HT，可适用于二氢叶酸还原酶筛选系统；在细胞培 养过程中应及时监测葡萄糖含量，低于3g/L时，补至6g/L;该培养基不含抗结团剂，如果细胞出现聚团，可在 培养起初时补1ml/L的抗结团剂(JXM50104)。

产品特点

1：化学成分限定、不含动物源成分、不含水解物、不含蛋白质或任何其他化学成分不明确的物质，批间 差异小；
2：生产过程符合GMP指导原则，严格执行低内毒素标准；

储存说明及注意事项 

1：所有的产品都需要避光，2-8℃保存，避免冷冻；
2：超过标签注释的有效期产品，不建议使用；
3：若培养基产生颗粒物或浑浊，应立即停止使用；

培养条件

1：初始接种密度：2-5 x105 cells/mL；
2：培养容器：带滤膜可通气的摇瓶，125ml摇瓶中培养体积：30ml，250ml摇瓶培养体积：60ml；
3：培养条件：37℃，5%CO2 ，加湿，125±5 rpm（19-mm throw）；120±5 rpm（25-mm throw）；
4：培养基：JxCD CHO 无血清培养基不含L-谷氨酰胺，使用前请添加4mM L-谷氨酰胺；

细胞复苏及适应培养(直接适应)

1：取30ml的JxCD CHO 无血清培养基，加入125ml摇瓶中，添加4mM L-谷氨酰胺(货号：JXM50105)， 1ml/L的抗结团剂(JXM50104)，放入培养箱中预热；
 2：从液氮中取出细胞，在37℃水浴中快速解冻，将含有细胞的冻存液加入20ml冷的JxCD CHO 无血清培 养基中，以200g转速离心3分钟，然后丢弃上清；
 3：用新鲜的培养基重悬细胞，计数，按照2-5 x105  cells/mL的密度将细胞接种至提前预温的摇瓶中，培养 3天后传代；
 4：此过程至少传代3次，如果细胞密度能达到2x106 cells/mL以上，并且细胞活率在90%以上，则说明细胞 成功适应，方可进行下一步；

细胞驯化适应

大多数情况下，CHO细胞可以从添加血清或无血清培养基中适应至JxCD CHO 无血清培养基中，如直接 适应不顺利时，建议选用以下驯化的方式适应：
 1：将原始的培养基与JxCD CHO 无血清培养基以1:1的比例，加入125摇瓶中，添加4mM L-谷氨酰胺(货号： JXM50105)，1ml/L的抗结团剂(JXM50104)，放入培养箱中预热；
 2：提高细胞接种密度至5-10 x105  cells/mL，接入125摇瓶中，3-4天后细胞密度达到2-3x106 cells/mL，并且细 胞活率在90%以上，进行传代；
 3：以此类推，逐步将JxCD CHO 无血清培养基的比例提高(1：2，1：4，0：1)，直至将原始培养基全部替 换成JxCD CHO 无血清培养基，如果细胞密度能达到2x106 cells/mL以上，并且细胞活率在90%以上，则说明 细胞成功适应，方可进行下一步；

细胞悬浮培养

1：取30ml的JxCD CHO 无血清培养基，加入125摇瓶中，添加4mM L-谷氨酰胺(货号：JXM50105)，放入 培养箱中预热；
2：将经适应好的细胞以2-3 x105  cells/mL的密度接种至上述培养基中，连续培养3天；
3：第3天开始补充6%的JxCD CHO补料培养基-1 (货号：JXM1301-B) 1.8ml，0.06%的JxCD CHO 补料培养基-2 (货号：JXM1301-C)0.18ml，补充4mM谷氨酰胺(货号：JXM50105)，监测葡萄糖含量低于 3g/L时，补至6g/L；
4：依次在第5，第7，第9，第11，13天各补6%的JxCD CHO补料培养基-1 (货号：JXM1301-B) 1.8ml， 0.06%的JxCD CHO补料培养基-2 (货号：JXM1301-C)0.18ml，补充4mM谷氨酰胺(货号：JXM50105)，监测葡萄 糖含量低于3g/L时，补至6g/L；
5：当细胞活率低于70%，培养终止，收集上清，获取目标产物；