无血清细胞冻存液（GMP级）

一、产品原理

本冻存液为化学成分明确配方，含有多种胞内、胞外双重冷冻保护组分。胞内保护组分穿透细胞膜，抑制细胞内部冰晶生成；胞外保护组分结合水分子，降低冷冻过程电解质浓度，减轻渗透压冲击，减少冷冻 - 复苏过程细胞损伤。成品即用，无需自行配比，无需程序降温设备，细胞分装后直接 - 80℃存放，简化细胞冻存操作流程。不含血清、无异种动物源成分，降低外源因子污染风险。

二、产品特点

1. 化学成分明确，无血清、无动物源组分，降低病毒、支原体等外源污染风险；原料采用中国药典药辅级原料，注射用水配制。

2. 即用型成品，无需配制，无需程序降温盒 / 程序降温仪，细胞分装后直接 - 80℃冻存，支持整板冻存。

3. GMP 洁净车间生产，全套质控放行；拥有医疗器械备案，CDE 药用辅料登记推进中，可提供毒理、工艺全套研究资料，支持联合申报。

4. 细胞复苏活率高，多数细胞复苏活率可达 90-98%；干细胞冻存后可维持表面标志物及多向分化潜能。HUMSC 人间充质干细胞冻存 12 个月，复苏活率维持 98-99%，细胞形态、表面标记物保持正常；传统冻存液同等条件下活率会下降至 85%。

5. 适配范围广，支持干细胞、免疫细胞、原代细胞、肿瘤细胞系、CHO 表达细胞等。

6. 批次稳定性好，批间差异小，适配常规科研以及细胞治疗前期研发工作。

三、与传统含血清冻存液对比

表格

四、适用细胞

人间充质干细胞（脐带、脂肪、骨髓来源）、BMSC、ADSC、NK 免疫细胞、HUVEC 内皮细胞、CHO-K1、3T3、HepG2、A549、HeLa 等肿瘤细胞系、各类原代细胞。

五、储存条件

· 运输条件：常温运输

· 短期存放：4℃保存

· 长期储存：-20℃避光保存，避免反复冻融

· 开封后建议 3 个月内用完

六、操作步骤

细胞冻存

1. 按照常规流程消化、收集细胞，离心去除上清，收集细胞沉淀；

2. 使用预冷的本无血清细胞冻存液重悬细胞，调整至合适细胞密度；

3. 将细胞悬液分装至冻存管；

4. 冻存管直接放入 - 80℃超低温冰箱；

5. 放置过夜（1000 分钟以上）后，转移至液氮罐进行长期保存。

提示：禁止直接将冻存管投入液氮，避免细胞因降温速率过快受损。

细胞复苏

1. 取出冻存管，37℃水浴快速摇晃融化；

2. 融化完成后，将细胞悬液缓慢滴入预温的完全培养基中，轻柔混匀；

3. 离心去除含有冻存液的上清；

4. 使用完全培养基重悬细胞，接种培养瓶或者培养板，置于培养箱培养。

七、注意事项

1. 本产品仅限科研及细胞治疗研发使用，严禁直接用于人体回输。

2. 避免反复冻融试剂，反复冻融将降低冻存保护效果。

3. 冻存液含有 DMSO 类冷冻保护剂，操作佩戴手套，避免皮肤直接接触。

4. 冻存细胞务必过夜 - 80℃之后再转入液氮，不可直接投入液氮。

5. 试剂出现浑浊、沉淀，禁止继续使用。

6. 全程遵守细胞培养无菌操作规范。