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EU新生RNA检测试剂盒

EU 新生 RNA 检测试剂盒利用 EU 核苷类似物掺入活细胞新合成 RNA,通过点击化学反应偶联红色荧光基团完成标记,无需同位素,温和处理保护细胞形态与抗原位点,可使用荧光显微镜、共聚焦开展成像检测,用于细胞转录活性、药物转录抑制效应以及病毒复制相关的科研研究。

产品详情


产品简介

细胞内新生RNA的变化是评价细胞活性的重要指标。EU (5-Ethynyl-Uridine)  是一种尿嘧啶核苷 类似物,  能够在细胞RNA转录时期代替尿嘧啶 (U)  掺入新合成的RNA分子中,  然后通过基于 EU 与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有 EU  的 RNA分子中,这样就可以 进行高效快速的荧光检测RNA的转录活性。本试剂盒将直接测定细胞内新生RNA的变化,病毒复制 等方面的研究。

传统的检测新生RNA的方法为以放射性同位素标记RNA等方法然后进行Southern blot进行检测。 但是这种方法需要放射性同位素标记及后续的复杂操作步骤。利用EU标记新生RNA的检测方法不需  要剧烈的RNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、RNA整体结构  及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确,能在细胞和组织水平反映新生RNA转录  活性的状况。该试剂盒只需要简单的操作步骤,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜以及高内涵筛选  仪进行新生RNA的转录活性。


试剂盒组分

产品编号

试剂

浓度

试剂量

 

 

 

 

 

JX0906

细胞固定液

15 ml

EU  溶液

1000×

40 μl

反应缓冲液

10×

1 ml

催化剂溶液

25×

400 μl

TAMRA红色荧光溶液

400×

25 μl

缓冲添加剂

粉末

200 mg

Hoechst 33342

1000×

20 μl

使用前须知

该试剂盒是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。 非贴壁细胞可在孵育EU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。


案例图示

image 

图注:将 J82 细胞分别不处理和用药物放线菌素 D(阴性对照药物)进行处理之后,通过该公司的 EU 新生 RNA 检测试剂盒检测正常细胞中显示非常强烈的 RNA 信号,而放线菌素 D 处理的细胞中 没有显著的信号。


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